PDA培养基的配制方法及流程

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这次水一个培养基的配方。

  • 名称:PDA培养基,即马铃薯葡萄糖琼脂培养基
  • 英文:Potato Dextrose Agar
  • 用途:供霉菌和酵母菌计数及分离培养(GB4789.15-2010和ISO标准)。
  • 原 理:马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长,葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂,氯霉素可抑制细菌的生长
  • 简略配料表(可根据需求按比例缩减配料):

    1. 马铃薯(去皮):200g
    2. 葡萄糖:20g
    3. 琼脂:20g
    4. 水:1000mL
    5. pH值:自然
    6. 氯霉素 0.1g(可有可无,以实验为准)

详细配置过程如下:

  1. 称量去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15--20g。
    削好的土豆
    削好的土豆
  2. 将马铃薯切成小块,放入锅中,加水1000ml,煮沸30min。
  3. 用纱布滤去马铃薯残渣。
  4. 加入葡萄糖、琼脂。
  5. 葡萄糖溶解后,加入适量的水以补充加热过程中损失的水分,定容至1000ml。
  6. 分装,根据不同的实验目的,可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。分装过程中注意不要使培养基沾染在管(瓶)口上以免浸湿棉塞,引起污染。如不使用棉塞也可用橡皮塞或特制的金属、塑料试管帽,为让空气可以自由进出,橡皮塞不要过紧,灭菌前应夹一纱线在管口。
  7. 分装完成后,在管口或瓶口塞上棉塞。棉塞要用未脱脂的经弹松的棉花,棉塞可过滤空气,防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发,故在植物病理学研究工作中普遍使用。
  8. 包扎。加塞后,将试管用线绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳扎好。用记号笔注明培养基名称、配制日期、组别、制作人等。
  9. 灭菌。将上述培养基以0.103MPa,121C,高压蒸气灭菌20分钟。

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